ТЕСТ-СИСТЕМА НА ОСНОВЕ ПОЛИМЕРАЗНОЙ ЦЕПНОЙ РЕАКЦИИ В РЕАЛЬНОМ ВРЕМЕНИ ДЛЯ ОБНАРУЖЕНИЯ АФРИКАНСКОЙ ЧУМЫ СВИНЕЙ
Представлены результаты разработки диагностического теста на основе полимеразной цепной реакции в реальном времени (ПЦР-РВ) для обнаружения ДНК африканской чумы свиней (АЧС) в патологическом материале, а также в культуральной жидкости. Определены высокая чувствительность и специфичность обнаружения ДНК в органах и тканях животных, не уступающая применяемому в странах Евросоюза референтному набору реагентов для определения ДНК АЧС методом ПЦР-РВ. Выбрана более быстрая и эффективная методика выделения ДНК с использованием колонок mini spin Quick-gDNA™ MiniPrep по сравнению с методом выделения ДНК на неорганическом сорбенте. Показана высокая корреляция результатов обнаружения ДНК АЧС методом ПЦР-РВ и результатов обнаружения антигена вируса АЧС методом конкурентного иммуноферментного анализа (ИФА), полученных с помощь тест-системы ИФА «АЧС- CEPOTEСT/INGEZIM РРА СОMРAС». Разработанная тест-система может быть использована различными ветеринарными службами для эффективного мониторинга вируса АЧС с целью локализации, ликвидации и предупреждения дальнейшего распространения болезни. ; The results obtained using the diagnostic kit based on real-time polymerase chain reaction to detect the DNA of the African Swine Fever in the pathological material, as well as in the culture fluid, are presented. A high sensitivity and specificity for detection of the DNA in the organs and tissues of animals was shown to be useful for detection in the European Union referentiality reagent kits for DNA detection by real time PCR of ASFV. More rapid and effective method of DNA extraction using columns mini spin Quick gDNA™ MiniPrep was suggested and compared to the method of DNA isolation on the inorganic sorbent. High correlation of the results of the DNA detection of ASFV by real-time PCR and antigen detection results ASFV by competitive ELISA obtained with the ELISA SEROTEST/INGEZIM СOMRAС PPA was demonstrated. The kit can be used in the veterinary services for effective monitoring of ASFV to contain, eliminate and prevent further spread of the disease.